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Exosome isolation kit Plus (forSerum/Plasma)
外泌体提取试剂盒（血清/血浆）
产品名称 | 货号 | 规格 | ||
外泌体抽提试剂盒（血清/血浆） | YJ04002 | 50ml | ||
运输和保存方法：室温
一、产品简介：
外泌体（Exosomes）是一种直径在30-200 nm的微小囊泡，可由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液当中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速离心、试剂盒提取等方法。其中超速离心分离得到外泌体，纯度高，可满足于后续不同实验的需求，但是仪器要求高，周期长，工作量大。
本试剂盒可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒，普通的实验室离心机就可以完成，提取的外泌体适用于下游的细胞共培养、电镜、分析、Western Blot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。
二、操作方法：
样品预处理：
1、收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。
2、血清/血浆样品转移至离心管中，4℃，3000×g 离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。
3、将转移的上清，4℃，10,000×g 离心20 min，弃沉淀，将上清液转移至新的离心管中。
外泌体分离：
1、向预处理后的样品中，加入4 倍体积的1×PBS 充分混匀。
血清/血浆+PBS | 提取试剂 |
200ul+800ul | 200ul |
1ml+4ml | 1ml |
5ml+20ml | 5ml |
2、在PBS稀释后的样品中，继续加入相应量的提取试剂；盖紧离心管盖，涡旋振荡1-2 min，放置于4℃冰箱静置2-3 h。
3、取出装有混合液的离心管，4℃，10,000×g离心60 min，弃上清，收集富含外泌体的沉淀。
4、用1/5体积的样本体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物，使其充分悬浮于PBS后，将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。
5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃，12,000×g离心2 min，弃沉淀，保留上清液，该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。
6、纯化后的外泌体可于4℃保存3天，-80℃ 长期保存，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。