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货号 YJ00002: 外泌体提取-组织样本
一、服务简介：
EVs已成功地从血液、尿液和唾液等体液中分离出来，但直接从组织分离EVs的研究还很有限。组织样本直接分离的EVs相比于细胞系培养或者从体液中分离的EVs具有明显的优势。
二、服务平台仪器：
仪器名称 | 品牌货号 | 特征 | 功能作用 |
超高速离心机 | 贝克曼Optima XPN | 最大离心力802000g | 超高速离心提取 |
纳米粒子分析仪 | 马尔文NS300 | 粒径检测范围10-2000nm | 粒径分布和浓度 |
透射电镜仪 | 赛默飞Tecnai G2 | 观察微结构 | 拍摄外泌体形态 |
荧光显微镜 | 奥林巴斯 | 荧光和白光 | 外泌体细胞示踪 |
细胞培养箱 | 赛默飞 3111 | CO2培养箱 | 细胞培养 |
脑立体定位注射仪 | 众实 | 脑立体定位注射外泌体 | 定位注射外泌体 |
小动物活体成像仪 | Cliper IVIS lumina II | 波长范围：400-900nm | 外泌体活体示踪 |
动物房 | 国产品牌 | SPF级别 | 动物饲养 |
astral-DIA分析仪器 | Orbitrap Astral | 二级碎片离子定量 | 鉴定外泌体蛋白 |
三、服务流程：
客户提供组织样本（干冰运输）。
组织酶消化解离。
超速离心法收集外泌体。
提供收集的外泌体样本。
四、样本要求：
1. 客户提供：足量的新鲜组织样本（脑组织，心脏组织，肺组织，肝组织，脾脏组织，肾脏组织，皮肤组织等）。
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：3个工作日。
五、组织外泌体背景知识分享
EVs已成功地从血液、尿液和唾液等体液中分离出来，但直接从组织分离EVs的研究还很有限。组织样本直接分离的EVs相比于细胞系培养或者从体液中分离的EVs具有明显的优势。①首先，细胞系培养缺乏肿瘤微环境的复杂性，真实的肿瘤微环境中，肿瘤细胞、结构细胞和免疫细胞有相互作用。②其次，与细胞系来源的EVs相比，肿瘤组织来源的EVs包含更丰富的信息来源，因为细胞系可能不能很好地代表肿瘤。③第三，虽然肿瘤EVs可以从体液中分离出来，但是它们将与其他细胞和器官来源的EVs混合在一起。通过从肿瘤组织中直接分离EVs，可以获得肿瘤最直接来源的EVs。因为这些EVs有分泌至各种体液循环的潜能，因此可以先获取组织EVs，找到有潜力的生物标志物，再回到血液验证标志物的性能，对于标志物发掘具有重要的意义。
一般，组织EVs提取的方法包括三个过程。首先，组织切片，使组织具有更大的表面积。其次，在细胞培养基中利用组织解离酶与组织切片孵育，目的是使组织EVs扩散到培养基中。最后，通过密度梯度离心、分子尺寸排阻等方法从培养基中分离EVs。需要注意的是组织切片和组织消化过程中避免细胞的破碎，因为细胞破碎后会有大量的囊泡产生。