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Exosome isolation kit Plus (for BodyFluids)
外泌体提取试剂盒（体液）PRO版
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
外泌体抽提试剂盒（体液） | rcnexo107pro-2T | 2T | 358 |
外泌体抽提试剂盒（体液） | rcnexo107pro-5T | 5T | 758 |
外泌体抽提试剂盒（体液） | rcnexo107pro-20T | 20T | 2058 |
运输和保存方法：4℃ 有效期：12个月
注意：本产品仅适用于科研实验！a
一、产品简介：
外泌体（Exosomes）是一种直径在30-200 nm的微小囊泡，可由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、体液等体液当中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速离心、试剂盒提取等方法。其中超速离心分离得到外泌体，纯度高，可满足于后续不同实验的需求，但是仪器要求高，周期长，工作量大。
本试剂盒采用独特的分离技术，可以快速从体液如脑脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等体液中获得大量完整的外泌体颗粒，适用于下游的细胞共培养、电镜分析、WesternBlot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。
组份名称 | 2T | 5T | 20T | 存储 |
体液预处理试剂 | 0.2 ml | 0.5 ml | 2 ml | 4℃ |
外泌体抽提试剂 | 0.6ml | 1.5 ml | 6 ml | 4℃ |
纯化柱 | 2T | 5T | 20T | 4℃ |
单次提取量 | 1ml | 1ml | 1ml |
二、操作方法：
体液样本收集：
1、收集新鲜的样品，快速加入体液预处理试剂（体液体积：体液预处理试剂=10:1），快速旋涡混匀。
2、4℃短期存储存储（不要超过72h）或者-80℃（不超过2个月）。
样品预处理：
1、收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。
2、样品转移至离心管中，4℃，3000×g 离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。
外泌体分离：
1、使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。
2、向样品中加入1/4样本体积的外泌体抽提试剂，涡旋振荡1 min充分混匀后，放置于4℃冰箱静置2-3h(静置时间越长，提取效率越高，但不能超过24小时)。
体液体积 | 体液预处理试剂 | 外泌体抽提试剂 |
1 ml | 0.1ml | 0.275 ml |
2 ml | 0.2ml | 0.55ml |
3、取出装有混合液的离心管，4℃，3000×g离心60 min，弃上清，收集富含外泌体的沉淀。
4、再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以3000×g离心1min，弃上清(注：尽可能吸尽上清液)。
5、外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5mL离心管中(建议用200 μL左右1×PBS重悬)。
6、收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃以12,000×g离心2min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒(若沉淀较多，可12,000×g,2min离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液)。
7、纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入纯化柱的上室中，于4℃以3,000×g离心10min，离心后收集纯化柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒(注：纯化柱不可重复使用)。
8、纯化后的外泌体可于4℃保存3天，如需长期保存建议存放在-80℃，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。
三、结果展示
注意事项：
1. 为了确保获得的外泌体提取成功，请先购买试剂盒，体液收集后需及时添加预处理试剂，我们也有配套的体液预处理试剂（rcnexo109p）在售，如果考虑后期使用超速离心，也可以先购买此试剂；
2. 产品只针对体液来源的外泌体分离，不适用，细胞上清，血清/血浆中外泌体的抽提；
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。