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Exosome isolation kit Plus (for Animaltissue)
外泌体提取试剂盒（组织）
货号 | 规格 | 价格（元） | |
外泌体抽提试剂盒（组织） | rcnexo108-2T | 2T | 380 |
外泌体抽提试剂盒（组织） | rcnexo108-5T | 5T | 990 |
外泌体抽提试剂盒（组织） | rcnexo108-20T | 20T | 3180 |
运输方法：4℃运输 有效期：12个月
注意：本产品仅适用于科研实验！
一、产品简介：
外泌体（Exosomes）是一种直径在30-200 nm的微小囊泡，可由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、组织等体液当中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速离心、试剂盒提取等方法。其中超速离心分离得到外泌体，纯度高，可满足于后续不同实验的需求，但是仪器要求高，周期长，工作量大。
本试剂盒可以快速从组织中获得大量完整的外泌体颗粒，普通的实验室离心机就可以完成，提取的外泌体适用于下游的细胞共培养、电镜、分析、Western Blot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。
组份名称 | 2T | 5T | 20T | 储存 |
组织预处理试剂-A | 2 ml | 5 ml | 20 ml | -20 ℃ |
组织预处理试剂-B | 0.5 ml | 1 ml | 2 ml | -20 ℃ |
外泌体抽提试剂 | 1ml | 2.5ml | 10ml | -20 ℃ |
纯化柱 | 2T | 5T | 20T | -20 ℃ |
单次提取组织量 | 0.1g | 0.1g | 0.1g | 0.1g |
二、操作方法：
组织样本收集：
1. 组织预处理试剂准备：取1ml组织预处理试剂-A加入0.25ml组织预处理试剂-B充分混匀备用
2. 取新鲜组织或者冻存后的组织, 无菌生理盐水冲洗干净, 剪成1mm3大小的碎块。
3. 加入组织预处理试剂（组织重量：预处理试剂=0.1g : 1.25ml）, 37 ℃水浴处理30min，每5分钟轻轻混匀。（也可以在37℃摇床上80-100的转速处理20min）。
4. 离心取上清：反应液以8,000 ×g（~10,100 rpm）离心10 min，将上清液转移至新的离心管中；
5. 离心去杂质碎片：将离心上清液转移至新的离心管中，于4℃以12,000 ×g离心10 min，去除样品中的杂质碎片；
外泌体分离：
1、使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。
2、向样品中加入1/4样本体积的外泌体抽提试剂，涡旋振荡1 min充分混匀后，放置于4℃冰箱静置2-3h（静置时间越久提取效率越高，但不能超过24小时）。
组织预处理后的上清 | 外泌体抽提试剂 |
1ml | 0.25ml |
4ml | 1ml |
3、取出装有混合液的离心管，4℃，3000×g离心60 min，弃上清，收集富含外泌体的沉淀。
4、再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以10,000×g离心2min，弃上清(注：尽可能吸尽上清液)。
5、外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5mL离心管中(建议用200 μL左右1×PBS重悬)。
6、收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃以12,000×g离心2min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒(若沉淀较多，可12,000×g,2min离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液)。
7、纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入纯化柱的上室中，于4℃以3,000×g离心10min，离心后收集纯化柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒(注：纯化柱不可重复使用)。
8、纯化后的外泌体可于4℃保存3天，如需长期保存建议存放在-80℃，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。
三、结果展示
注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。