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Exosome isolation kit Plus (for urine)
外泌体提取试剂盒（尿液）
产品名称 | 货号 | 规格 | 有效期 |
外泌体抽提试剂盒（尿液） | rcnexo109pro | 2T/5T/20T | 12个月 |
运输和保存方法：室温
注意：本产品仅适用于科研实验！
一、产品简介：
外泌体（Exosomes）是一种直径在30-200 nm的微小囊泡，可由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液当中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。目前外泌提取主要有超速离心、试剂盒提取等方法。其中超速离心分离得到外泌体，纯度高，可满足于后续不同实验的需求，但是仪器要求高，周期长，工作量大。
本试剂盒可以快速从尿液中获得大量完整的外泌体颗粒，普通的实验室离心机就可以完成，提取的外泌体适用于下游的细胞共培养、电镜、分析、Western Blot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。
组份名称 | 2T | 5T | 20T | 储存 |
尿液预处理试剂 | 2 ml | 5 ml | 20 ml | -20℃ |
外泌体抽提试剂 | 10ml | 25ml | 100ml | 常温 |
纯化柱 | 2T | 5T | 20T | 常温 |
二、操作方法：
尿液样本收集：
收集新鲜的样品，快速加入尿液预处理试剂（尿液体积：尿液预处理试剂=10:1），快速旋涡混匀。
4℃短期存储存储（不要超过72h）或者-80℃（不超过2个月）。
样品预处理：
1、收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。
2、样品转移至离心管中，4℃，3000×g 离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。
外泌体分离：
使用前请将外泌体抽提试剂充分混匀。
向样品中加入1/4样本体积的外泌体抽提试剂，涡旋振荡1 min充分混匀后，放置于4℃冰箱静置2-3 h。
尿液体积 | 外泌体抽提试剂 |
20ml | 5ml |
40ml | 10ml |
取出装有混合液的离心管，4℃，10,000×g离心60 min，弃上清，收集富含外泌体的沉淀。
再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以10,000×g离心2min，弃上清(注：尽可能吸尽上清液)。
外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5mL离心管中(建议用200 μL左右1×PBS重悬)。
收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃以12,000×g离心2min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒(若沉淀较多，可12,000×g,2min离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液)。
纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入纯化柱的上室中，于4℃以3,000×g离心10min，离心后收集纯化柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒(注：纯化柱不可重复使用)。
纯化后的外泌体可于4℃保存3天，如需长期保存建议存放在-80℃，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。
三、结果展示
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NTA结果显示抽提获得的外泌体分散性好，大小均一，峰形单一，符合外泌体特征。 | 透射电镜结果显示抽提获得的外泌体呈现典型的双层囊膜结构，背景清晰。 | WB结果显示抽提的外泌体表达TSG101，CD63和CD81等外泌体标记蛋白。 |
注意事项：
为了确保获得的外泌体提取成功，请先购买试剂盒，尿液收集后需及时添加预处理试剂，我们也有配套的尿液预处理试剂（rcnexo109p）在售，如果考虑后期使用超速离心，也可以先购买此试剂。；
产品只针对尿液来源的外泌体分离，不适用，细胞上清，血清/血浆中外泌体的抽提，如果需要进行血清/血浆的外泌体分离， 请选用血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒；
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
FAQ:
Q1：研匠生物尿液外泌体快速提取试剂盒，核心用途是什么？
Q2：该试剂盒与传统超速离心提取外泌体相比，有哪些优势？
Q3：外泌体是什么，主要分布在哪些体液中？
Q4：使用该试剂盒提取外泌体，需要特殊仪器吗？
Q5：提取后的外泌体，可用于哪些下游实验应用？
Q6：传统超速离心提取外泌体，存在哪些痛点？