外泌体蛋白鉴定试剂盒(CD81&HSP70)
产品名称 | 货号 | 规格 |
外泌体蛋白鉴定试剂盒(CD81&HSP70) | rcnexo116 | 2T/5T |
保存方法:-20℃ 有效期: 12个月
注:本产品仅用于科学研究,不可用于临床。
产品简介:
外泌体鉴定的国际标准《细胞外囊泡杂志MISEV2018》对外泌体的表征规定了最小试验要求:Western blot对外泌体标志蛋白进行检测,至少需要3个阳性蛋白(至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白)、1个阴性蛋白质标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,以及溶质蛋白TSG101、Alix、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Calnexin、细胞核蛋白histone H3或高尔基体蛋白GM130。
二、产品组分: | |||
组份名称 | 数量 | 规格 | 对应货号 |
外泌体蛋白提取专用试剂盒 | 1 | 2T/5T | rcnexo113 |
CD81抗体 | 1 | 10ul/25ul | |
HSP70抗体 | 1 | 10ul/25ul | |
HRP-羊抗兔二抗 | 1 | 10ul/25ul |
注:1T为提取100ul外泌体的量,有些试剂较少,使用前请离心。
三、操作方法:
取100ul新鲜的外泌体或者冻存的外泌体至离心管。
向离心管中依次加入裂解液A轻轻混匀,然后加入裂解液B,混匀后置于冰上裂解10min。
外泌体体积 | 裂解液A | 裂解液B |
100ul | 5ul | 35ul |
200ul | 10ul | 70ul |
注:试剂加样前请离心,请按照加样顺序加样。
离心机提前预冷,裂解结束,涡旋一下后离心(4℃,12000g,15min)。
离心结束后取上清液BCA定量检测蛋白浓度。
加入5X loading buffer(裂解液:5X loading buffer=4:1),100℃煮样10分钟,注意用试管架压防止爆盖子(使蛋白加热变性带上负电荷)。
下同WB的实验步骤。
经过测试的应用:
Western Blot (WB) 稀释比例WB : 1:1000
产品信息:
名称 | Host / Isotype | 稀释比例 | 反应性 | 蛋白大小 |
CD81抗体 | Rabbit / IgG | 1:1000 | human, mouse, rat | 24-26 kDa |
HSP70抗体 | Rabbit / IgG | 1:1000 | human, mouse, rat | 70 kDa |
HRP-羊抗兔二抗 | Goat | 1:1000 | Rabbit IgG | |
Storage Conditions | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. |
结果展示:
CD81 HSP70
